
厭氧培養(yǎng)箱是用于培養(yǎng)厭氧微生物的關(guān)鍵設(shè)備,操作時(shí)需嚴(yán)格遵守以下注意事項(xiàng)以確保實(shí)驗(yàn)安全和培養(yǎng)效果:
一、操作前準(zhǔn)備
1. 檢查氣源
確認(rèn)氮氣、氫氣、二氧化碳氣瓶壓力充足(通常需≥0.3MPa),氣體純度≥99.99%,避免雜質(zhì)影響厭氧環(huán)境。
檢查氣體管道連接是否密封,無泄漏(可用肥皂水檢測)。
2. 預(yù)還原培養(yǎng)基
培養(yǎng)基使用前需煮沸驅(qū)氧,并迅速放入厭氧箱內(nèi)預(yù)還原24小時(shí)以上(如使用刃天青指示劑,確保無色狀態(tài))。
3. 設(shè)備預(yù)運(yùn)行
提前開啟厭氧箱電源,運(yùn)行至少2小時(shí)(或按說明書要求),確保箱內(nèi)達(dá)到厭氧狀態(tài)(氧濃度<1ppm,可用氧指示劑驗(yàn)證)。
二、操作過程注意事項(xiàng)
1. 樣品傳遞規(guī)范
使用專用傳遞艙(過渡艙):
先抽真空(至 0.1MPa),再充氮氣(重復(fù)2 3次),確保氧氣被置換。
避免頻繁開啟傳遞艙,每次操作后需恢復(fù)厭氧環(huán)境。
2. 個(gè)人防護(hù)
佩戴無粉手套(避免粉末污染箱內(nèi)環(huán)境),必要時(shí)使用口罩和護(hù)目鏡。
操作氣體(如氫氣)時(shí)嚴(yán)禁明火或靜電。
3. 箱內(nèi)操作要點(diǎn)
工具和物品需用酒精消毒并晾干后放入,避免帶入氧氣或水分。
動(dòng)作輕緩,減少氣流擾動(dòng),避免手套破損(定期檢查手套密封性)。
培養(yǎng)皿、試管等容器需密封(如使用厭氧袋或膠塞)。
三、使用后維護(hù)
1. 清潔與消毒
定期用75%酒精或專用消毒劑擦拭箱體內(nèi)壁、手套和托盤,防止微生物污染。
廢液、廢培養(yǎng)基需及時(shí)移出,避免滋生雜菌。
2. 氣體管理
關(guān)閉氣瓶閥門后,需釋放管道殘余壓力(防止逆流)。
長期不用時(shí),每周至少開機(jī)運(yùn)行1次以維持厭氧環(huán)境。
3. 催化劑再生
鈀催化劑(除氧劑)每2 3個(gè)月于160℃烘烤2小時(shí)再生,失效后及時(shí)更換。
四、安全警示
1. 氫氣風(fēng)險(xiǎn)
氫氣易r易爆,確保箱體接地良好,操作時(shí)遠(yuǎn)離火花、高溫設(shè)備。
2. 缺氧風(fēng)險(xiǎn)
避免將頭部伸入箱內(nèi),防止窒息(箱內(nèi)為無氧環(huán)境)。
3. 應(yīng)急處理
如遇漏氣或著火,立即關(guān)閉氣源,使用二氧化碳滅火器(不可用水或干粉)。
五、常見問題處理
箱內(nèi)濕度高:添加硅膠干燥劑或開啟除濕功能。
氧濃度升高:檢查手套密封性、傳遞艙操作步驟是否規(guī)范,或更換催化劑。
培養(yǎng)污染:排查傳遞艙消毒程序、培養(yǎng)基滅菌是否c底。

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